​细胞培养中与培养液相关的常见问题及解决

细胞培养中与培养液相关的常见问题及解决

1、细胞生长缓慢或死亡

可能原因：血清批次质量差、培养液 pH 异常(过酸 / 过碱)、渗透压过高、污染(隐性支原体污染);

解决：更换优质血清、检查 CO₂培养箱参数(5% CO₂维持 pH)、检测渗透压(推荐 300 mOsm/kg 左右)、做支原体检测。

2、培养液浑浊或出现沉淀

可能原因：细菌污染(浑浊 + pH 下降)、血清析出(4℃储存时脂蛋白沉淀)、反复冻融导致成分变性;

解决：污染需丢弃并消毒环境;血清沉淀可 37℃温浴溶解(不影响使用);避免反复冻融，分装储存。

3、细胞形态异常(如聚团、贴壁差)

可能原因：血清中黏附因子不足、培养液中 Ca²⁺/Mg²⁺浓度不适、pH 过高(细胞聚团);

解决：更换高纯度血清、调整基础培养基类型(如含钙量高的 DMEM 适合贴壁细胞)、校准 pH 值。

4、实验重复性差

可能原因：血清批间差异、培养液配制时比例误差;

解决：筛选并批量储存同一批次血清，严格按配方称量，使用无菌技术避免污染。