如何储存细胞培养液？

如何储存细胞培养液？

细胞培养液的使用与储存规范

1、储存管理

未开封基础培养基：2~8℃冷藏，保质期 12~24 个月(依品牌);

含血清完全培养基：4℃冷藏，开封后 1 个月内用完(避免血清成分降解);

无血清培养基：-20℃冻存(分装为 50~100 mL / 瓶)，避免反复冻融(≤3 次);

避光储存：含酚红、维生素的培养基需避光，防止成分氧化失效。

2、使用操作规范

融化与平衡：冻存培养液 4℃过夜融化，使用前室温平衡 30 分钟(避免温度冲击细胞);

无菌操作：在百级生物安全柜内分装、添加血清 / 添加剂，瓶口用 75% 酒精消毒;

浓度校准：添加谷氨酰胺时，终浓度通常为 2 mM;抗生素按 “1% 体积比” 添加(100× 母液);

避免污染：完全培养基建议添加抗生素仅用于短期培养，长期培养需定期更换培养基(每 2~3 天 1 次)。

3、常见问题与解决

培养液浑浊：大概率为细菌污染，立即丢弃，排查培养箱、操作环境;

细胞生长缓慢：可能是谷氨酰胺降解或血清批次不佳，更换稳定型谷氨酰胺或批次血清;

pH 异常：若培养液变酸(黄色)，可能是细胞密度过高或 CO₂浓度不足，及时换液并校准培养箱 CO₂浓度。