细胞培养液的关键使用注意事项

细胞培养液的关键使用注意事项

1、储存与解冻：

储存：未开封培养液需 2-8℃冷藏(避免冷冻，防止成分析出);添加血清后建议分装(10-50mL / 瓶)，-20℃冷冻保存(避免反复冻融破坏因子活性)。

解冻：从 - 20℃移至 4℃过夜解冻，或 37℃水浴快速解冻(需不断摇晃使温度均匀，避免局部过热破坏成分)，解冻后 24 小时内使用。

2、pH 与渗透压调节：

培养时需配合 CO₂培养箱(5% CO₂)，维持碳酸氢钠缓冲体系的 pH 稳定;若室温放置过久，pH 可能升高(因 CO₂逸出)，需通入少量 CO₂回调。

渗透压需与细胞来源物种匹配(如哺乳动物细胞适宜 280-320 mOsm/kg)，过高 / 过低会导致细胞死亡。

3、污染防控：

操作前需紫外线消毒超净台(30 分钟)，使用无菌耗材(吸管、培养皿)，避免交叉污染;

若怀疑污染(如培养液浑浊、出现絮状物、细胞变圆漂浮)，需立即丢弃(避免污染扩散)，必要时添加抗生素抢救(但效果有限)。

4、批次验证：

血清或培养液需先做 “批次测试”：用目标细胞(如 HeLa)测试其增殖效率、细胞活性，选择最优批次(避免因批次差异导致实验失败)。